一、酵素濃度：
1.受質濃度充足時，反應速率（R）與酵素濃度（[E]）成正比。
2.受質量固定時，反應速率（R）與酵素濃度（[E]）僅在一定範圍內成正比。
二、受質濃度：
無論酵素之量是充足或受到限制，反應速率（R）僅在一定範圍內與受質濃度
（[S]）成正比。
三、溫度：
1.在適當的溫度範圍內，酵素活性隨著溫度的升高而增加；但是當溫度超過其最
適宜的範圍時，酵素活性及迅速下降。一般而言，在低溫環境中，酵素雖然沒
有活性，構造卻未被破壞；因此，當溫度再度上升時，酵素活性可漸漸恢復。
2.因為高溫對蛋白質結構會產生不可逆的反應，因此當酵素處於過高的溫度一段
時間之後，構造與活性都會被破壞，使酵素無法與受質結合；即使再把溫度下
降到適宜的溫度範圍，酵素仍無法恢復原有的構造與活性。
3.不同種類的酵素，其最低溫度、最適宜溫度及最高溫度的溫度範圍也不同。大
部分的酵素，其催化反應最適宜溫度範圍多在 25℃～35℃之間，但有一些生
物體內的酵素特別耐高溫，例如 PCR 反應過程中常用來自溫泉細菌 Thermus
aquaticus 的 DNA 聚合酶（Taq DNA polymerase），可耐 95℃的高溫。
4.酵素於最低溫度到最適宜的溫度範圍內，反應速率隨溫度的增高而加快。溫度
高於最適宜溫度時，反應速率快速下降。
四、pH 値(酸鹼值)：
1.每一種蛋白質都有一個最適宜的 pH 値幫助它的分子維持正常構造，當 pH 値 改變時，蛋白質分子內側鏈的離子狀態會隨之改變，導致分子變性而失去原有的
活性。因此，幾乎每一種酵素都有最適宜的 pH 値。
2.以人體為例，多數酵素在 pH6～8 之間，活性較高。但有些酵素在強酸或強鹼
情況下，其催化速率反而較快，例如胃蛋白酶在 pH2 情況下活性最好，而胰
蛋白酶則在 pH8.5 時活性較佳。